lunes, 15 de junio de 2015

Proteinas II (Dialisis).

Diálisis es la separación de las sustancias que están juntas o mezcladas en una misma disolución, a través de una membrana semi-permeable que las filtra, es decir  una membrana que permite el paso selectivo de las moléculas del disolvente, pero impide el paso de compuestos de mayor peso molecular. De ésta manera se puede concentrar un producto o separarlo de una mezcla de moléculas.
Es necesario realizar éste proceso a baja temperatura y en agitación constante, ya que la diálisis es un proceso molecular que depende exclusivamente de los movimientos aleatorios de las moléculas individuales


MATERIALES: 
  • Dializador(gomita elástica,botella cortada, papel celofán)  
  • Gelatina en solución
  • AgNO3 (Nitrato de Plata)
  • Vaso de Bohemia
  • CuSO4 al 1 %
  • NaOH  al 10%


En agua, tanto el nitrato de plata como el cloruro de sodio se disocian de la siguiente manera:


  • AgNO3    H2O       (Ag +) + (NO3-)  (ac)
              Catión Plata     Anión Nitrato


  • NaCl     H2O         (Na+) + (Cl -) (ac)
              Catión  Sodio  Anión Cloruro
Para luego:
(Ag+) (ac) + (Cl-)  (ac)      AgCl (s)

Cloruro de Plata
El cloruro de plata es un sólido  blanco, y es su formación lo que determina que el ensayo sea positivo o negativo.

PROCEDIMIENTO:

PARTE1:

  1.  Colocar en dos tubos de ensayos muestra de la solución que se pondrá en el dializador.
  2. Aplicarle la reacción de Biuret y AgNO3
  3.  Registrar lo observado.


OBSERVACIONES:
Una vez realizados estos pasos, podemos observar que en ambos casos la reacción dio positiva, porque quedo blanco, por ende la solución tiene sales y proteínas.
PARTE 2:




  1. Colocar dentro de un dializador una solución con proteínas y sales
  2. Sumergir en un vaso de Bohemia con agua destilada (sin ningún desecho)
  3. Luego de algunos minutos, tomar muestras de ambas partes del dializador.
  4. Aplicar los ensayos anteriores.
  5. Registrar las observaciones.





Vaso de Bohemia que contenía agua destilada:

 Biuret
NEGATIVO
 AgNO3
POSITIVO 



A partir de esto, podemos concluir que si bien el AgNO3 nos dio positivo, por lo tanto denotó la presencia de sales, que anteriormente no había dentro del vaso de bohemia, el ensayo de Biuret nos dio negativo, lo que quiere decir que no detectó proteínas en muestra. Esto prueba que las proteínas no atravesaron la membrana semi-permeable del dializador  


Muestra dentro del dializador:


 Biuret
POSITIVO
 AgNO3
POSITIVO 

Cuando reacciono con AgNO3, la muestra dio positivo, porque contiene NaCl, ésta se disocio obteniendo la presencia de cationes cloruro, que cuando reaccionan con los cationes plata forman AgCl.

El ensayo de Biuret dio positivo, porque el interior contiene gelatina y es una proteína, por lo tanto podemos concluir que las proteinas de la muestra no pudieron atravesar la membrana semi-permeable del dializador. Esto nos permite concluir que la diálisis funciono.